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網(wǎng)站首頁 ◇ 解決方案 ◇ 【解決方案】馬兜鈴酸的檢測
馬兜鈴酸的檢測· UPLC-MS/MS法 ·
馬兜鈴酸是一類硝基菲結(jié)構(gòu)化合物，主要存在于馬兜鈴科馬兜鈴屬和細辛屬植物中，含馬兜鈴酸的中藥材主要
包括金耳環(huán)、杜衡、*蓮、天仙藤、木香馬兜鈴、尋骨風、細辛等。馬兜鈴酸具有腎毒性、致突變及致癌作
用，被世界衛(wèi)生組織致癌物清單列為1類致癌物，長期或超量不規(guī)范服用含馬兜鈴酸的植物可引起腎臟損害、
致癌和致突變等副作用。
目前，有關馬兜鈴酸的檢測方法，主要是用甲醇水或甲醇提取，然后直接上機檢測，這就存在基質(zhì)效應大、回
收率不穩(wěn)定等問題。為了解決這些問題，迪馬科技根據(jù)目標化合物的性質(zhì)，建立了馬兜鈴酸的檢測方法，樣品
先用水溶解，再用酸化乙腈提取，提取液再進行兩次凈化，第一次先用C18凈化提取液，然后再用PWA-2小
柱進行二次凈化，氮吹定容，上機。樣品經(jīng)過多次凈化，除去了樣品雜質(zhì)，減小基質(zhì)效應，并且還保證了目標
物的回收率，結(jié)果顯示，基質(zhì)效應和回收率都在90-110%之間，完全滿足客戶需求。
1、適用范圍
本方案適用感特靈膠囊、丁細牙痛膠囊、胃炎寧顆粒、小青龍合劑中馬兜鈴酸的檢測。
2、標準品配制
(1) 馬兜鈴酸儲備液(500μg/mL)：準確稱取適量馬兜鈴酸標準品，用甲醇溶解定容，配置成濃度為500μg/mL標準儲備液；
(2) 標準中間液Ⅰ：準確吸取適量馬兜鈴酸標準儲備液，用甲醇稀釋并定容，配置成濃度為1μg/mL的中間液Ⅰ；
(3) 標準中間液Ⅱ：準確吸取適量馬兜鈴酸中間液Ⅰ，用甲醇稀釋并定容，配置成濃度為0.1μg/mL的中間液Ⅱ。
3、提取
稱取試樣0.5g于50mL離心管中，加入2mL水，渦旋混勻30s，再準確加入25mL 5%乙酸乙腈溶液，渦旋10min，超聲提取10min，加入專用凈化包(Cat.#: 645xx)，渦旋混合2min，4000r/min離心2min。取上清10mL，加入 C18，渦旋混合2min，4000r/min離心2min，上清液備用。
4、凈化
ProElut® PWA-2 250mg/6mL (Cat.#: 65823)
(1)活化：用5mL甲醇和5mL 2%甲酸水溶液活化小柱；
(2)上樣：將4mL備用液上柱，棄去流出液；
(3)淋洗：依次用5mL水、5mL 2%甲酸水溶液、5mL甲醇淋洗小柱，棄去流出液，推干；
(4)洗脫：用4mL 5%氨水甲醇洗脫小柱，接收流出液，推干，混勻，過PTFE針頭式過濾器(Cat.#: 37178)，上機分析。
注：同方法制備基質(zhì)匹配標準溶液
5、分析條件
(1) UPLC條件
色譜柱：Endeavorsil® C18，100x2.1mm, 1.8μm (Cat.#: 87003)
流速：0.3mL/min
進樣量：5μL
柱溫：35℃
流動相：A: 0.1%甲酸水溶液(含1mmol/L乙酸銨) B: 乙腈
(2) 質(zhì)譜條件
電離模式：ESI
掃描方式：正離子掃描
檢測方式：多反應監(jiān)測
電噴霧電壓：5500V
霧化氣壓力：50psi
輔助氣壓力：50psi
氣簾氣壓力：20psi
離子源溫度：500℃
6、添加回收結(jié)果
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