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食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中環(huán)己基氨基磺酸鹽的測定（GB 5009.97-2023）于2024年3月6日正式實(shí)施，代替GB 5009.97-2016 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中環(huán)己基氨基磺酸鈉的測定。

新準(zhǔn)規(guī)定了食品中環(huán)已基氨基磺酸鹽的測定方法：

第一法 氣相色譜法適用于食品(蒸餾酒、發(fā)酵酒、配制酒、料酒及其他含乙醇的食品除外)中環(huán)己基氨基磺酸鹽的測定;

第二法 液相色譜法適用于食品中環(huán)已基氨基磺酸鹽的測定;

第三法 液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法適用于食品中環(huán)己基氨基磺酸鹽的測定

新標(biāo)準(zhǔn)修改了第三法液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法的定量方式為內(nèi)標(biāo)法。

迪馬科技根據(jù)GB 5009.97-2023第三法，建立了UPLC-MS/MS測定方法，采用內(nèi)標(biāo)法定量，減少了第一法 氣相色譜法和第二法 液相色譜法均需要衍生的過程，測定流程更加簡單，提高檢測效率。

本方案適用魷魚絲、饅頭、豆皮、醬油、醋等食品中環(huán)己基氨基磺酸鹽的檢測。

(1)環(huán)己基氨基磺酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液6mg/mL溶于水（Cat.#：48191）；

(2)環(huán)己基氨基磺酸中間液：準(zhǔn)確吸取適量環(huán)己基氨基磺酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，用水稀釋并定容，配置成濃度為10.0μg/mL的中間液；

(3)環(huán)己基氨基磺酸同位素內(nèi)標(biāo)儲(chǔ)備液100μg/mL溶于水（Cat.#：48244）；

(4)環(huán)己基氨基磺酸同位素內(nèi)標(biāo)中間液：準(zhǔn)確吸取適量環(huán)己基氨基磺酸同位素內(nèi)標(biāo)儲(chǔ)備液，用水稀釋并定容，配置成濃度為5μg/mL的中間液。

3.1 醬油、醋等液體樣品

稱取2g樣品于50mL離心管中，加入200μL環(huán)己基氨基磺酸同位素內(nèi)標(biāo)中間液，用含0.1%甲酸的乙腈水溶液^*稀釋至20mL，混勻, 渦旋5min,超聲10min，9000r/min離心5min，取樣液過有機(jī)濾膜（Cat.#：37178），供上機(jī)測定。

3.2 魷魚絲、饅頭、豆皮等固體樣品

稱取2g樣品于50mL離心管中，加入200μL環(huán)己基氨基磺酸同位素內(nèi)標(biāo)中間液，加入20mL含0.1%甲酸的乙腈水溶液，渦旋5min，超聲30min，9000r/min離心5min，取樣液過有機(jī)濾膜（Cat.#：37178），供上機(jī)測定。

^*含0.1%甲酸的乙腈水溶液：吸取1.0mL甲酸，加入300mL乙腈，用水稀釋至1000mL，混勻。

(1) UPLC條件

色譜柱：Leapsil^® C18，100x2.1mm, 2.7μm (Cat.#：86005)

流速：0.4mL/min   

進(jìn)樣量：2μL  

柱溫：45℃

流動(dòng)相：A:0.1%甲酸水溶液 B:0.1%甲酸甲醇溶液

梯度設(shè)置：

(2) 質(zhì)譜條件

電離模式：ESI

掃描方式：負(fù)離子掃描

檢測方式：多反應(yīng)監(jiān)測

電噴霧電壓：-4500V

霧化氣壓力：50psi

輔助氣壓力：50psi

氣簾氣壓力：20psi

離子源溫度：500℃

定性離子對(duì)、定量離子對(duì)、碰撞氣能量及去簇電壓見下表: