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網(wǎng)站首頁 ◇ 技術(shù)支持 ◇ 食品中三氯蔗糖的測定——HPLC法解決方案
三氯蔗糖又名三氯半乳蔗糖，俗稱蔗糖素，由英國泰萊公司(Tate&Lyie)與倫敦大學共同研制并于1976年申請的一種新型甜味劑。由于其具有甜度高(甜度為蔗糖的600倍)、甜味純正等特點，被認為是目前zui的功能性甜味劑之一，代表了目前強力甜味劑研究的zui高水平。雖然科學家們經(jīng)過長期的毒理實驗證明其具有較高的安全性，但也有三氯蔗糖可誘發(fā)偏頭疼發(fā)作的報道。
建立食品中三氯蔗糖的測定方法，可為食品生產(chǎn)企業(yè)提供生產(chǎn)性指導，并為質(zhì)量監(jiān)督部門提供食品質(zhì)量監(jiān)管依據(jù)。我國國家標準《GB 22255-2014 食品安全國家標準 食品中三氯蔗糖（蔗糖素）的測定》中制定了三氯蔗糖的HPLC-ELSD檢測方法。
方法優(yōu)勢：
迪馬科技在參考國家標準《GB 22255-2014 食品安全國家標準 食品中三氯蔗糖（蔗糖素）的測定》基礎(chǔ)上，進行了方法優(yōu)化，推出《食品中三氯蔗糖的測定》方法，該方法：
采用固相萃取-液相色譜法測定食品中的三氯蔗糖，使用ProElut PLS 固相萃取柱凈化樣品，通過HPLC-ELSD檢測；
前處理步驟簡單、凈化效果好、重現(xiàn)性好，定量限7.5 mg/kg，符合《GB 22255-2014 食品安全國家標準 食品中三氯蔗糖（蔗糖素）的測定》對三氯蔗糖的*規(guī)定；
適用于各省市出入境、質(zhì)檢、疾控、食品藥品檢驗所、第三方檢測機構(gòu)、食品檢測機構(gòu)、大型食品生產(chǎn)商、高校和科研院所等。
以下為詳細解決方案，敬請參考！
食品中三氯蔗糖的測定——HPLC法
1、適用范圍
本方案適用于液態(tài)奶、酸奶、醬油、醋、餅干、奶酪、奶茶、可樂和果凍中三氯蔗糖的檢測，方法定量限7.5 mg/kg。
2、標準品配制
標準儲備溶液：準確稱取標準品，用水配制成10 mg/mL的儲備液，吸取一定體積10 mg/mL儲備液用水配成濃度為1000 μg/mL的儲備液。
3、提取
3.1 含蛋白脂肪類液體：液態(tài)奶、酸奶、醬油和醋
10 mL樣品，加入8 mL 水和2 mL 200 g/L乙酸鉛溶液，振蕩2 min，超聲提取5 min，6000 rpm離心5 min，取10 mL上清液，待凈化；
3.2 含蛋白脂肪類固體：餅干、奶酪和奶茶
5 g樣品，加入8 mL 水和2 mL 200 g/L乙酸鉛溶液，振蕩2 min，超聲提取5 min，6000 rpm離心5 min，取10 mL上清液，待凈化；
3.3 飲料：可樂（量取前超聲排氣泡）
10 mL樣品，加入10 mL 水，混勻，取10 mL，待凈化；
3.4 果凍
5 g樣品，加入5 mL 水，熱水超聲溶解，混勻，趁熱凈化。
注：《GB 22255-2014 食品安全國家標準 食品中三氯蔗糖（蔗糖素）的測定》中提取液為75%甲醇水溶液，減壓濃縮過程中暴沸嚴重，不易操作。
4、凈化——ProElut 200 mg/6 mL PLS（Cat.#：68012）
(1)活 化： | 依次向柱中加入5 mL甲醇、5 mL水，棄去流出液； |
(2)上 樣： | 將待凈化液加入柱中，棄去流出液（控制流速不超過每秒1滴）； |
(3)淋 洗： (4)洗 脫： | 向柱中加入5 mL 20%甲醇水溶液，棄去流出液； 向柱中加入3 mL甲醇，收集流出液； |
(5)定 容： | 將洗脫液在50 ℃下減壓蒸干，用流動相定容至1 mL，供HPLC分析。 |
5、色譜條件
色譜柱：Diamonsil C18(2) 150 × 4.6 mm，5 μm（Cat.#：99601）
流速：1.0 mL/min
進樣量：20 μL
柱溫：35 ℃
檢測器：SEDEX LT-ELSD，溫度：40℃，壓力：3.5 bar，Gain：6
流動相：A：水；B：乙腈
梯度設(shè)置
時間/Min. | 0 | 14 | 15 | 22 | 23 | 30 |
A（%） | 89 | 89 | 10 | 10 | 89 | 89 |
B（%） | 11 | 11 | 90 | 90 | 11 | 11 |
6、添加回收結(jié)果
食品中三氯蔗糖的HPLC檢測的添加回收結(jié)果
添加水平200 mg/kg | 添加水平20 mg/kg | 添加水平7.5 mg/kg | 空白含量(μg/mL) | ||||
回收率(%) | 加標量 | 回收率(%) | 加標量 | 回收率(%) | 加標量 | ||
早餐奶 | 99.01 | 10 mg/mL 200 μL | 109.82 | 1000 μg/mL 200 μL | 96.52 | 1000 μg/mL 75 μL | — |
巧克力奶 | 99.70 | 10 mg/mL 200 μL | 100.91 | 1000 μg/mL 200 μL | 95.88 | 1000 μg/mL 75 μL | — |
咖啡奶 | 100.34 | 10 mg/mL 200 μL | 112.34 | 1000 μg/mL 200 μL | 126.00 | 1000 μg/mL 75 μL | — |
養(yǎng)樂多 | 128.83 | 10 mg/mL 200 μL | — | — | — | — | 130.8 |
酸奶 | — | — | 105.58 | 1000 μg/mL 200 μL | 123.42 | 1000 μg/mL 75 μL | — |
醬油 | 77.85 | 10 mg/mL 200 μL | — | — | — | — | 113.48 |
醋 | 108.22 | 10 mg/mL 200 μL | 143.64 | 1000 μg/mL 200 μL | 205.47 | 1000 μg/mL 75 μL | — |
餅干 | — | — | 102.64 | 1000 μg/mL 100 μL | 103.28 | 1000 μg/mL 37.5 μL | — |
奶酪 | — | — | 88.04 | 1000 μg/mL 100 μL | 82.78 | 1000 μg/mL 37.5 μL | — |
奶茶 | — | — | 101.48 | 1000 μg/mL 100 μL | 169.05 | 1000 μg/mL 37.5 μL | — |
可樂 | — | — | 103.97 | 1000 μg/mL 200 μL | 98.49 | 1000 μg/mL 75 μL | — |
果凍 | — | — | 93.89 | 1000 μg/mL 100 μL | 96.27 | 1000 μg/mL 37.5 μL | — |
食品中三氯蔗糖的測定——HPLC法相關(guān)產(chǎn)品信息：
貨號 | 名稱 | 規(guī)格 |
樣品前處理 | ||
68012 | ProElut PLS | 200 mg/6 mL, 30/pk |
244358 | 12管防交叉污染真空SPE萃取裝置 | 12位 |
4803 | 1,3,6mL柱管通用連接器 | 15/pk |
4806 | 考克(控制流量) | 15/pk |
99011 | 真空/正壓兩用泵，無油 | 1/pk |
99013 | 抽濾瓶套裝 (包括硅橡膠管2米,2L抽濾瓶及橡膠塞) | 1/pk |
30039 | FitMax針頭式過濾器 Nylon | 13 mm,0.22 μm 100/pk |
30040 | FitMax針頭式過濾器 Nylon | 13 mm,0.45 μm 100/pk |
標準品 | ||
53-69293-100G | 三氯蔗糖[56038-13-2] | 100 g |
色譜柱及保護柱 | ||
99601 | Diamonsil C18(2) | 150 × 4.6 mm，5 μm |
HPLC溶劑?緩沖鹽?離子對試劑 | ||
50101 | 乙腈 HPLC級 | 4 L |
50102 | 甲醇 HPLC級 | 4 L |
通用色譜產(chǎn)品 | ||
52401B | 瓶架/藍色（現(xiàn)貨） | 50孔 |
52401A | 瓶架/白色（現(xiàn)貨） | 50孔 |
1034 | 樣品瓶（棕色/螺紋） | 2 mL, 100/pk |
1035 | 樣品瓶蓋/含墊（已經(jīng)組裝） | 100/pk |
H80465 | HPLC 進樣針 | 25 μL |
紅色產(chǎn)品貨號#30039、#30040、#1034、#1035*
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